Kromatografi kolonları kuru doldurma dry packing yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur

Kromatografi kolonları kuru doldurma (dry packing) yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur?

Kromatografi uygulamanız yeniden kullanılabilir cam kolonlara izin veriyorsa, bunları doğru şekilde doldurduğunuzdan ve yeniden doldurduğunuzdan emin olmanız gerekir. 

Burada bir kolonun kuru doldurma sürecini açıklayacağım ve size kuru doldurma tekniğiyle doldurulmuş bir kolonun nasıl dengeye getirileceği hakkında ayrıntılı bilgiler vereceğim. Süreci görselleştirmenize yardımcı olacak ve yazıların arasında sıkıntıdan kurumanızı önleyecek bir resim bile ekledim.

Eşim ve ben, sahip olduğumuz plastik eşyaları ziyan etmeden yeniden kullanmaya çalışırız. Plastik poşetleri çöp veya alışveriş poşeti olarak, eski yoğurt ve dondurma kaplarını saklama kabı vb. olarak, plastik şişeleri ve kapakları bahçe işleri ve hobiler için yeniden kullanmaya çalışıyoruz. Anafikri anladınız. Hem bütçeniz hem de çevre için ideal bir yaklaşım.

Laboratuvarda ve kromatografide kullandığımız plastik miktarı da şaşırtıcıdır. Tek kullanımlık ürünler, sonuçların hatasız ve kontaminasyonsuz olmasını sağlamak için genellikle gereklidir. Ancak bazı durumlarda hem maliyet tasarrufu sağlayan hem de çevre dostu olan satın alma kararları vermek mümkündür.

Örneğin, kromatografi cam kolonlarının kullanıcılar tarafından yeninden doldurulması, daha az hassas olan bazı saflaştırmalar için uygun ve ekonomik bir çözümdür. Yeniden doldurmaya ne kadar zaman ayırdığınızı hesaba katmalı ve kolonun profesyonelce doldurulamaması riskinin de farkında olmalısınız, bu nedenle ayrıştırma verimliliği ve tekrarlanabilirlik düşebilir. Ama kendi kolonlarınızı kendiniz doldurmaya karar verdiyseniz, yol boyunca size yardım etmek için buradayım.

Bir cam kolonu doldurmanın iki yolu vardır, kuru veya sıvı doldurma (dry packing ve slurry packing). Bu blog yazısında, kromatografi sisteminizden mümkün olan en iyi sonuçları alabilmeniz için kuru doldurmanın nasıl çalıştığını size açıklamak istiyorum.

Sıkıştırılmış bir gaz kullanarak kuru doldurma hızlı ve kolay bir işlemdir, ancak doldurma yoğunluğu düşük olur. Bu nedenle bu yaklaşım, orta ila büyük boyutlu silika partikülleri (25-200 μm) için daha uygundur. Daha küçük partikülleriniz varsa, cam kolonu bir pompa aracılığıyla doldurmak için silika ve çözücüden oluşan bir bulamaç (slurry) kullanmalısınız. İlerideki bir blog yazısında size sıvı yükleme sürecini anlatacağım.

Kuru doldurma (dry packing) veya sıvı dolurma (slurry packing) teknikleri seçiminden bağımsız olarak doldurma işlemi üç aşamaya ayrılabilir:

 
  • Hazırlık
  • Doldurma
  • Sıkıştırma
Dolgu malzemelerini bir ayrıştırma kolonunda kurutmak için aşağıdaki ekipmanlara ihtiyacınız vardır:
 
  • Ayrıştırma kolonu
  • Dolum kabı
  • Silika
  • Azot silindiri
  • Huni
Hazırlık aşamasında, kolonu iyice temizlenene kadar yıkamanız ve tamamen kuruyuncaya kadar beklemeniz gerekir. Doldurma adımı için kolonu dikey olarak doldurma kabındaki vidayla birlikte sıkıştırmanız gerekir. Daha sonra silikayı bir huni yardımıyla sıkı olmayacak bir biçimde doldurmaya başlayabilirsiniz. Doldurma kabı, kolon hacminin en az %10'u fazla olacak şekilde silika ile doldurulmalıdır.

En önemlisi, kolona hiçbir zaman dokunmamalı veya herhangi bir titreşime neden olmamalısınız çünkü bu, parçacıkların kaçınılmaz olarak ayrılmasına ve kolonun işe yaramaz hale gelmesine neden olacaktır.

Sıkıştırma aşaması sırasında, azot silindirinden kolon boyunca bir tıslama duyulmayana kadar azot üflenir. Daha sonra azot silindirinin ana valfini kapatmalı ve basıncı tamamen boşaltmalısınız. Bu prosedür, azot hortumu çıkarıldığında kolon yatağının dağılmasını önlemek için çok önemlidir.
Kolon artık dengelenmeye hazırdır.





















Kuru doldurulan bir kolon nasıl dengeye getirilir?

Peki, dengeleme işlemini doğrudan ayrıştırma için gerekli olan çözücü ile yapmanız gerekir. Yeni doldurulmuş bir kolondan ilk 100 ila 200 ml sıvının atılmasını ve ancak o zaman çözücünün dolaştırılmasını tavsiye ediyorum. Bu ihtiyatlı adım, yıkanmış ince silika jel parçacıklarının pompaya girmesini önler. Kolondan hava çıkışı durduğunda ve dedektörün taban çizgisi stabil kaldığında, ayrıştırma işlemine devam edebilirsiniz.
Kolon bakımı, doldurma, yükleme ve depolama hakkında daha fazla bilgi için ücretsiz Chromapedia İkinci Sayı: Sarf Malzemeleri ve Numune Yükleme'yi inceleyebilirsiniz.

Sanıyorum artık kendi cam kolonlarınızı kuru doldurma yöntemiyle doldurmak için hazırsınız. Bir sonraki gönderiyi beklerken daha fazla bilgi edinmek isterseniz, sabit faz için silika dışında başka hangi seçeneklere sahip olduğunuzu öğrenmek için daha önceki bir blog yazımı inceleyebilirsiniz. Umarım bu yazı sizin için çok kuru kalmamıştır, eğer öyleyse takipte kalın, bir sonraki kromatografi yazısı kesinlikle daha ıslak olacak.

Bir dahaki sefere kadar,
 
Bart Denoulet

 
Kaynak: https://www.barts-blog.net/dry-packing-of-a-chromatography-column-in-three-steps/

 

Takip Et

Facebook
Twitter
LinkedIn
Instagram
YouTube

Paylaş

Facebook
Twitter
LinkedIn

Bunları da beğenebilirsiniz!

Kullanılmış Maskeler Mikroplastik Riski Oluşturuyor

Kullanılmış Maskeler Mikroplastik Riski Oluşturuyor

Bilim insanları, tek kullanımlık maskelerin çevre için önemli ölçüde mikroplastik riski oluşturabileceği konusunda uyarıyor ve atıkların bertarafı için gelişmiş stratejilere acil bir ihtiyaç olduğunu vurguluyor.
  • 19 Ağu 2021

Devamı...

Nükleik Asitler Nasıl Saflaştırılır

Nükleik Asitler Nasıl Saflaştırılır?

Yeni bir laboratuvar kurma sürecinde nükleik asit saflaştırma için neye ihtiyacınız olduğunu mu merak ediyorsunuz? Yoksa numunelerinizin aşağı akış uygulamanız için yeterince saf olmadığını mı fark ettiniz? Öyleyse doğru yerdesiniz. Bu makale, “Numunelerden Saf Nükleik Asitlere” serimizin dördüncü ve son bölümünü oluşturuyor. Nükleik asit ekstraksiyonu, bir PCR laboratuvarı kurulumu ve nükleik asit miktar tayini ve görselleştirme konularını ele aldıktan sonra, şimdi farklı saflaştırma yöntemlerinden bahsedeceğiz. Her tekni
  • 5 Ağu 2021

Devamı...

Nükleik Asitlerin Saflık ve Konsantrasyonunun Belirlenmesi

Nükleik Asitlerin Saflık ve Konsantrasyonunun Belirlenmesi

Nükleik asitlerin örneklerden saflaştırılması moleküler biyoloji laboratuvarlarında yaygın bir iş akışıdır. Doğru kararları almanıza yardımcı olmak için bir laboratuvar kurarken ve ekipman satın alırken nelere dikkat etmeniz gerektiğini açıklayan dört bölümlük bir dizi hazırladık. Nükleik asit ekstraksiyon yöntemlerini ve bir PCR laboratuvarının nasıl kurulduğunu anlattıktan sonra, şimdi nükleik asitlerin konsantrasyonunu, verimini ve saflığını belirlemek için farklı yöntemlere göz atacağız.
  • 27 Tem 2021

Devamı...

Bir PCR Laboratuvarı Nasıl Kurulur

Bir PCR Laboratuvarı Nasıl Kurulur?

Yeni bir laboratuvar kurmak heyecan verici olduğu kadar göz korkutucu bir süreç olabilir. Kendisine bir laboratuvar kurmak için yakın zamanda bu zorlukla yüzleşen INTEGRA, süreçten öğrendiklerini bu dört bölümlük dizide bir araya getirdi. Birinci bölümde nükleik asit ekstraksiyonu için neyin gerekli olduğu tartışıldıktan sonra, şimdi polimeraz zincir reaksiyonları (PCR) gerçekleştirirken nelerin dikkate alınması gerektiğine bakılacak.
  • 13 Tem 2021

Devamı...

Hiçbir Paylaşımı Kaçırmayın



İletişim Formu

Son paylaşımlar

Kullanılmış Maskeler Mikroplastik Riski Oluşturuyor

Kullanılmış Maskeler Mikroplastik Riski Oluşturuyor

Nükleik Asitler Nasıl Saflaştırılır

Nükleik Asitler Nasıl Saflaştırılır?

Nükleik Asitlerin Saflık ve Konsantrasyonunun Belirlenmesi

Nükleik Asitlerin Saflık ve Konsantrasyonunun Belirlenmesi

Bir PCR Laboratuvarı Nasıl Kurulur

Bir PCR Laboratuvarı Nasıl Kurulur?

Nükleik Asit Ekstraksiyonu İçin Gerekli Ekipmanlar Nelerdir

Nükleik Asit Ekstraksiyonu İçin Gerekli Ekipmanlar Nelerdir?

Protein Aktivitesinin Glikozilasyon Yoluyla Modifikasyonunun COVID19un Şiddetini Tahmin Etmek için Kullanılması

Protein Aktivitesinin Glikozilasyon Yoluyla Modifikasyonunun COVID-19’un Şiddetini Tahmin Etmek için Kullanılması

Biyofarmasötikler Nasıl Üretilir

Biyofarmasötikler Nasıl Üretilir?

Hücre Kültürü Çalışmalarında Saf Suyun Önemi Nedir

Hücre Kültürü Çalışmalarında Saf Suyun Önemi Nedir?

Doğal Bileşiklerin Saflaştırılması İçin Tavsiyeler

Doğal Bileşiklerin Saflaştırılması İçin Tavsiyeler

Antibiyotik Direncine Karşı Mücadelede Otomatik Pipetleme Robotlarının Kullanımı

Antibiyotik Direncine Karşı Mücadelede Otomatik Pipetleme Robotlarının Kullanımı

Covid19 Tanı Testlerinde Hücre Parçalanmasının Rolü

Covid-19 Tanı Testlerinde Hücre Parçalanmasının Rolü

ICPMS ve ICPOES analizlerinde saf suyun önemi nedir

ICP-MS ve ICP-OES analizlerinde saf suyun önemi nedir?

Flash kromatografi sistemlerinin bakımı nasıl yapılır

Flash kromatografi sistemlerinin bakımı nasıl yapılır?

Elektronik Pipetlerin Mikrobiyal Evrim Araştırmalarında Tarama için Kullanılması

Elektronik Pipetlerin Mikrobiyal Evrim Araştırmalarında Tarama için Kullanılması

Nanoemülsiyonlar CBD Yağını İçeceklere Karıştırmak

Nanoemülsiyonlar: CBD Yağını İçeceklere Karıştırmak

Laboratuvar için Farklı Saf Su Tipleri Hakkında Bilmeniz Gerekenler

Laboratuvar için Farklı Saf Su Tipleri Hakkında Bilmeniz Gerekenler

2021 için Kromatografi ve Rotary Evaporasyona Yönelik Kristal Küre Tahminleri

2021 için Kromatografi ve Rotary Evaporasyona Yönelik Kristal Küre Tahminleri

INTEGRA VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipetler Yardımıyla Yeni Nesil Bilim İnsanlarını Eğitmek

INTEGRA VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipetler Yardımıyla Yeni Nesil Bilim İnsanlarını Eğitmek

CBD Yağı Bazlı Nanoemülsiyonlar Üretmek için Kullanılan Yöntemler

CBD Yağı Bazlı Nanoemülsiyonlar Üretmek için Kullanılan Yöntemler

Hepatit B Enfeksiyonunu Önlemek için DNA Aşılarının Araştırılması

Hepatit B Enfeksiyonunu Önlemek için DNA Aşılarının Araştırılması

Gelin bu olağandışı yılı sıra dışı bir blog yazısıyla noktalayalım

Gelin bu olağandışı yılı sıra dışı bir blog yazısıyla noktalayalım!

Doğru Rezervuar ile Değerli Reaktiflerinizi Koruyun ve Tasarruf Edin

Doğru Rezervuar ile Değerli Reaktiflerinizi Koruyun ve Tasarruf Edin

Tanı Testleri için Kaliteli Enzimler Nasıl Oluşturulur

Tanı Testleri için Kaliteli Enzimler Nasıl Oluşturulur?

Papatya Çayındaki Ağır Metallerin Tespit Edilmesi

Papatya Çayındaki Ağır Metallerin Tespit Edilmesi

INTEGRA çözümleri tanı test ve araştırmalarını nasıl hızlandırıyor

INTEGRA çözümleri tanı test ve araştırmalarını nasıl hızlandırıyor?

Kararlı ve steril Propofol nasıl üretilir

Kararlı ve steril Propofol nasıl üretilir?

Kromatografi kolonları kuru doldurma dry packing yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur

Kromatografi kolonları kuru doldurma (dry packing) yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur?

Gıda Ambalajları için Yeşil Plastiklerin Geliştirilmesi

Gıda Ambalajları için Yeşil Plastiklerin Geliştirilmesi

VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipet Basel Üniversitesinde immünoloji araştırmalarını nasıl hızlandırıyor

VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipet Basel Üniversitesi'nde immünoloji araştırmalarını nasıl hızlandırıyor?

Hücre parçalanması nedir ve bunun için hangi metotlar kullanılır

Hücre parçalanması nedir ve bunun için hangi metotlar kullanılır?

RFID teknolojisi kromatografi analizlerine nasıl yardımcı olur

RFID teknolojisi kromatografi analizlerine nasıl yardımcı olur?

Biyomimikri ArGeye Giden Doğal Yol

Biyomimikri: Ar-Ge'ye Giden Doğal Yol

Elektronik Pipet Kullanmak için 5 Neden

Elektronik Pipet Kullanmak için 5 Neden

Aşı Geliştirme Çalışmalarında Microfluidizer Teknolojisi Nasıl Kullanılır

Aşı Geliştirme Çalışmalarında Microfluidizer Teknolojisi Nasıl Kullanılır?

Kromatografi analizlerinde pik bölünmesi ve pik omuzlanması nasıl önlenir

Kromatografi analizlerinde pik bölünmesi ve pik omuzlanması nasıl önlenir?

Virüslerin Saptanması ve Karakterizasyonunda HPLCnin Rolü Nedir

Virüslerin Saptanması ve Karakterizasyonunda HPLC'nin Rolü Nedir?

Kozmetik ürünlerin etiketlerindeki maddeler nasıl elde edilir

Kozmetik ürünlerin etiketlerindeki maddeler nasıl elde edilir?

Aşı Taşıyıcı Sistemlerin Tasarımında Lipid Nanopartiküllerin Kullanımı

Aşı Taşıyıcı Sistemlerin Tasarımında Lipid Nanopartiküllerin Kullanımı

Microfluidizer İşlemcileri Aşı Üretimine Destek İçin Nasıl Kullanılır

Microfluidizer İşlemcileri Aşı Üretimine Destek İçin Nasıl Kullanılır?

COVID19 için PCR işlemlerinizi hızlandırın

COVID-19 için PCR işlemlerinizi hızlandırın

Kahvenizin içinde ne var

Kahvenizin içinde ne var?

Etiketler

kromatografi   dry packing   slurry packing   flash   

preparatif   mobil faz   sabit faz   kartuş   

cam kolon   silika   saflaştırma   ayrıştırma   Büchi   

Makaledeki ürünler

Pure C850 FlashPrep Kromatografi Sistemi

Pure C-850 FlashPrep Kromatografi Sistemi