Kromatografi kolonları kuru doldurma dry packing yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur

Kromatografi kolonları kuru doldurma (dry packing) yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur?

Kromatografi uygulamanız yeniden kullanılabilir cam kolonlara izin veriyorsa, bunları doğru şekilde doldurduğunuzdan ve yeniden doldurduğunuzdan emin olmanız gerekir. 

Burada bir kolonun kuru doldurma sürecini açıklayacağım ve size kuru doldurma tekniğiyle doldurulmuş bir kolonun nasıl dengeye getirileceği hakkında ayrıntılı bilgiler vereceğim. Süreci görselleştirmenize yardımcı olacak ve yazıların arasında sıkıntıdan kurumanızı önleyecek bir resim bile ekledim.

Eşim ve ben, sahip olduğumuz plastik eşyaları ziyan etmeden yeniden kullanmaya çalışırız. Plastik poşetleri çöp veya alışveriş poşeti olarak, eski yoğurt ve dondurma kaplarını saklama kabı vb. olarak, plastik şişeleri ve kapakları bahçe işleri ve hobiler için yeniden kullanmaya çalışıyoruz. Anafikri anladınız. Hem bütçeniz hem de çevre için ideal bir yaklaşım.

Laboratuvarda ve kromatografide kullandığımız plastik miktarı da şaşırtıcıdır. Tek kullanımlık ürünler, sonuçların hatasız ve kontaminasyonsuz olmasını sağlamak için genellikle gereklidir. Ancak bazı durumlarda hem maliyet tasarrufu sağlayan hem de çevre dostu olan satın alma kararları vermek mümkündür.

Örneğin, kromatografi cam kolonlarının kullanıcılar tarafından yeninden doldurulması, daha az hassas olan bazı saflaştırmalar için uygun ve ekonomik bir çözümdür. Yeniden doldurmaya ne kadar zaman ayırdığınızı hesaba katmalı ve kolonun profesyonelce doldurulamaması riskinin de farkında olmalısınız, bu nedenle ayrıştırma verimliliği ve tekrarlanabilirlik düşebilir. Ama kendi kolonlarınızı kendiniz doldurmaya karar verdiyseniz, yol boyunca size yardım etmek için buradayım.

Bir cam kolonu doldurmanın iki yolu vardır, kuru veya sıvı doldurma (dry packing ve slurry packing). Bu blog yazısında, kromatografi sisteminizden mümkün olan en iyi sonuçları alabilmeniz için kuru doldurmanın nasıl çalıştığını size açıklamak istiyorum.

Sıkıştırılmış bir gaz kullanarak kuru doldurma hızlı ve kolay bir işlemdir, ancak doldurma yoğunluğu düşük olur. Bu nedenle bu yaklaşım, orta ila büyük boyutlu silika partikülleri (25-200 μm) için daha uygundur. Daha küçük partikülleriniz varsa, cam kolonu bir pompa aracılığıyla doldurmak için silika ve çözücüden oluşan bir bulamaç (slurry) kullanmalısınız. İlerideki bir blog yazısında size sıvı yükleme sürecini anlatacağım.

Kuru doldurma (dry packing) veya sıvı dolurma (slurry packing) teknikleri seçiminden bağımsız olarak doldurma işlemi üç aşamaya ayrılabilir:

 
  • Hazırlık
  • Doldurma
  • Sıkıştırma
Dolgu malzemelerini bir ayrıştırma kolonunda kurutmak için aşağıdaki ekipmanlara ihtiyacınız vardır:
 
  • Ayrıştırma kolonu
  • Dolum kabı
  • Silika
  • Azot silindiri
  • Huni
Hazırlık aşamasında, kolonu iyice temizlenene kadar yıkamanız ve tamamen kuruyuncaya kadar beklemeniz gerekir. Doldurma adımı için kolonu dikey olarak doldurma kabındaki vidayla birlikte sıkıştırmanız gerekir. Daha sonra silikayı bir huni yardımıyla sıkı olmayacak bir biçimde doldurmaya başlayabilirsiniz. Doldurma kabı, kolon hacminin en az %10'u fazla olacak şekilde silika ile doldurulmalıdır.

En önemlisi, kolona hiçbir zaman dokunmamalı veya herhangi bir titreşime neden olmamalısınız çünkü bu, parçacıkların kaçınılmaz olarak ayrılmasına ve kolonun işe yaramaz hale gelmesine neden olacaktır.

Sıkıştırma aşaması sırasında, azot silindirinden kolon boyunca bir tıslama duyulmayana kadar azot üflenir. Daha sonra azot silindirinin ana valfini kapatmalı ve basıncı tamamen boşaltmalısınız. Bu prosedür, azot hortumu çıkarıldığında kolon yatağının dağılmasını önlemek için çok önemlidir.
Kolon artık dengelenmeye hazırdır.





















Kuru doldurulan bir kolon nasıl dengeye getirilir?

Peki, dengeleme işlemini doğrudan ayrıştırma için gerekli olan çözücü ile yapmanız gerekir. Yeni doldurulmuş bir kolondan ilk 100 ila 200 ml sıvının atılmasını ve ancak o zaman çözücünün dolaştırılmasını tavsiye ediyorum. Bu ihtiyatlı adım, yıkanmış ince silika jel parçacıklarının pompaya girmesini önler. Kolondan hava çıkışı durduğunda ve dedektörün taban çizgisi stabil kaldığında, ayrıştırma işlemine devam edebilirsiniz.
Kolon bakımı, doldurma, yükleme ve depolama hakkında daha fazla bilgi için ücretsiz Chromapedia İkinci Sayı: Sarf Malzemeleri ve Numune Yükleme'yi inceleyebilirsiniz.

Sanıyorum artık kendi cam kolonlarınızı kuru doldurma yöntemiyle doldurmak için hazırsınız. Bir sonraki gönderiyi beklerken daha fazla bilgi edinmek isterseniz, sabit faz için silika dışında başka hangi seçeneklere sahip olduğunuzu öğrenmek için daha önceki bir blog yazımı inceleyebilirsiniz. Umarım bu yazı sizin için çok kuru kalmamıştır, eğer öyleyse takipte kalın, bir sonraki kromatografi yazısı kesinlikle daha ıslak olacak.

Bir dahaki sefere kadar,
 
Bart Denoulet

 
Kaynak: https://www.barts-blog.net/dry-packing-of-a-chromatography-column-in-three-steps/

 

Takip Et

Facebook
Twitter
linkedin
Instagram
YouTube

Paylaş

Facebook
Twitter
linkedin

Bunları da beğenebilirsiniz!

INTEGRA çözümleri tanı test ve araştırmalarını nasıl hızlandırıyor

INTEGRA çözümleri tanı test ve araştırmalarını nasıl hızlandırıyor?

COVID-19 krizi sırasında INTEGRA’nın likit transferi ürünleri portföyü, özellikle SARS-CoV-2 virüsü için test kapasitelerini hızlı bir şekilde artırma ihtiyacı içinde olan dünya çapındaki tanı laboratuvarlarında birçok moleküler tanılama iş akışında kullanılmaktadır. 
  • 20 Eki 2020

Devamı...

Kararlı ve steril Propofol nasıl üretilir

Kararlı ve steril Propofol nasıl üretilir?

Pandemi dünya çapında devam ederken, COVID-19 nedeniyle hastanede tedavi edilen hastalar için terapötik ilaçlara olan talep de sürüyor.
  • 13 Eki 2020

Devamı...

Gıda Ambalajları için Yeşil Plastiklerin Geliştirilmesi

Gıda Ambalajları için Yeşil Plastiklerin Geliştirilmesi

Araştırmacılar, ambalajlı kümes hayvanı ürünlerinin raf ömrünü uzatma ve sağlık risklerini azaltma potansiyeline sahip yeni bir biyobozunur (biodegradable) film üretiyor.

 
  • 29 Eyl 2020

Devamı...

VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipet Basel Üniversitesinde immünoloji araştırmalarını nasıl hızlandırıyor

VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipet Basel Üniversitesi'nde immünoloji araştırmalarını nasıl hızlandırıyor?

Basel Üniversitesi Biyotıp Bölümü, nörobiyoloji, enfeksiyon ve bağışıklık, kanser, kök hücre biyolojisi ve rejeneratif tıp gibi bir dizi önemli araştırma alanında uzmanlaşmış durumda. 
  • 22 Eyl 2020

Devamı...

Hücre parçalanması nedir ve bunun için hangi metotlar kullanılır

Hücre parçalanması nedir ve bunun için hangi metotlar kullanılır?

Bu blog yazısında, Microfluidizer Teknolojisi için önemli bir uygulama olan hücre parçalanması ile ilgili bazı temel bilgileri ele alıyoruz.
  • 15 Eyl 2020

Devamı...

RFID teknolojisi kromatografi analizlerine nasıl yardımcı olur

RFID teknolojisi kromatografi analizlerine nasıl yardımcı olur?

Birçoğumuz aynı anda 20 deneyi birden yapmak, meslektaşlarımızla laboratuvar ekipmanlarını paylaşmak ve numunelerin karışması gibi felaketlerle başa çıkmak durumundayız. Ancak her gün yaşanan bu streslerle başa çıkmanıza yardımcı olacak yollar var. 
  • 8 Eyl 2020

Devamı...

Biyomimikri ArGeye Giden Doğal Yol

Biyomimikri: Ar-Ge'ye Giden Doğal Yol

Bilim insanları ve mühendisler, basitten karmaşığa çok çeşitli sorunlara çözüm bulmak için genellikle doğaya bakarlar. 
  • 1 Eyl 2020

Devamı...

Elektronik Pipet Kullanmak için 5 Neden

Elektronik Pipet Kullanmak için 5 Neden

Manuel pipetler laboratuvarlar için harika araçlardır, ancak elektronik pipetlerin ne kadar faydalı olabileceğini gerçekten biliyor musunuz?
  • 25 Ağu 2020

Devamı...

Aşı Geliştirme Çalışmalarında Microfluidizer Teknolojisi Nasıl Kullanılır

Aşı Geliştirme Çalışmalarında Microfluidizer Teknolojisi Nasıl Kullanılır?

Aşı adjuvanları, lipid nanopartiküller (LNP'ler) ve protein antijenlerinin üretimi için hücre parçalanması Microfluidizer işlemcileri kullanılarak gerçekleştirilen üç temel ve iyi bilinen aşı uygulamasıdır.
  • 18 Ağu 2020

Devamı...

Kromatografi analizlerinde pik bölünmesi ve pik omuzlanması nasıl önlenir

Kromatografi analizlerinde pik bölünmesi ve pik omuzlanması nasıl önlenir?

Pik bölünmesi (peak splitting) ve pik omuzlanması (peak fronting) yüzünden geceleri gözünüze uyku girmiyor mu?

Mükemmel kromatogram piklerinin yalnızca güzel birer hayal olduğunu mu düşünüyorsunuz? Aslında onları gerçekten elde edebilirsiniz! Kromatogramınızı bozabilecek birkaç çirkin pik türünü ele almanın zamanı geldi. Talihsiz birer kromatogram fenomeni olan pik omuzlanması (peak fronting) ve pik bölünmesi (peak splitting) durumlarından güzel pikler elde etmek üzere nasıl kurtulacağınızı öğrenmek için okumaya devam edin.


 
  • 6 Ağu 2020

Devamı...

Virüslerin Saptanması ve Karakterizasyonunda HPLCnin Rolü Nedir

Virüslerin Saptanması ve Karakterizasyonunda HPLC'nin Rolü Nedir?

HPLC, aşıların geliştirilmesinde viral partiküllerin miktarının belirlenmesi ve karakterizasyonunun yanında hastalığın epidemiyolojisine bakarken farklı viral serotiplere karşılık gelen proteinlerin tanımlanması ve karakterizasyonu için de yaygın olarak kullanılan bir metottur. Bu teknikler nasıl çalışır? Bu tekniklerin, kullanılan en önemli çözücü olan saf su düşünüldüğünde, mümkün olan en doğru sonuçları vermelerini nasıl sağlayabiliriz?
  • 4 Ağu 2020

Devamı...

Kozmetik ürünlerin etiketlerindeki maddeler nasıl elde edilir

Kozmetik ürünlerin etiketlerindeki maddeler nasıl elde edilir?

Hiç fondöteninizin temel yapısını merak ettiniz mi? Ya da organik el kreminizin içindekiler etiketindeki maddeleri?
  • 7 Tem 2020

Devamı...

Aşı Taşıyıcı Sistemlerin Tasarımında Lipid Nanopartiküllerin Kullanımı

Aşı Taşıyıcı Sistemlerin Tasarımında Lipid Nanopartiküllerin Kullanımı

Lipid Nanopartiküllerin iletim sistemleri üzerindeki etkilerine ve bir iletim sistemi olarak LNP'lerin faydalarına genel bir bakış...
 
  • 8 Haz 2020

Devamı...

Microfluidizer İşlemcileri Aşı Üretimine Destek İçin Nasıl Kullanılır

Microfluidizer İşlemcileri Aşı Üretimine Destek İçin Nasıl Kullanılır?

En yaygın olarak kullanılan adjuvanların bazıları su içindeki yağ nano emülsiyonlarıdır.  Bu adjuvanlar, pandemik aşılar için idealdir çünkü antikor tepkileri iyi anlaşılmış ve güvenlidirler.
  • 30 Mar 2020

Devamı...

COVID19 için PCR işlemlerinizi hızlandırın

COVID-19 için PCR işlemlerinizi hızlandırın

Yeni Korona Virüs SARS-CoV-2'nin (COVID-19) ortaya çıkışı ve dünya çapındaki salgın, COVID-19 için hasta örneklerini test eden laboratuvarlara olan ihtiyacı benzeri görülmemiş biçimde artırarak, bilim insanlarını giderek artan COVID-19 test örnekleri ve iş yüküyle karşı karşıya bıraktı. 
  • 25 Mar 2020

Devamı...

Kahvenizin içinde ne var

Kahvenizin içinde ne var?

Kahve içmek, sağlıkla ilgili bir dizi fayda ile ilişkilendirilmektedir fakat işleme yöntemleri, kahvenin biyoaktif bileşik profili ve antioksidan aktivitesini etkileyebilir. Yeni bir çalışma buhar uygulamasının kavrulmuş kusurlu kahve çekirdekleri üzerindeki etkilerini araştırıyor.
  • 13 Ara 2019

Devamı...

Hiçbir Paylaşımı Kaçırmayın



İletişim Formu